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auch Serum-Neutralisationstest (SN-Test)
- ist charakterisiert durch die Bindung von spezifischen neutralisierenden Ab's an Oberflächen-Antigenen eines Viruspartikels
- In der Zellkultur resultiert daraus eine Hemmung des zytopathischen Effekts (i.e. Hemmung der Infektion)
- um dieses Methode zu quantifizieren, wird das Patienten-Serum verdünnt, während die Menge an Viruspartikeln (bekannter Virus, der im Labor kultiviert wird) konstant gehalten wird.
- bei Serum-Konzentrationen (niedrige Verdünnungen), die mehr Ab's enthalten als zugegebenes Virus, wird kein zytopathischer Effekt beobachtet.
- bei höheren Serum-Verdünnungen, in denen sich weniger Ab's als Viren befinden, werden zytopathische Effekte beobachtet.
- Titer = höchste Serum-Verdünnung, die noch ein positives Ergebnis zeigt
- Standard Virus-Verdünnung (Virusgebrauchsverdünnung) ist gewöhnlich zwischen 30 - 1000 ID50/100 µl, abhängig von der Kulturengröße
bei Plaque-verursachenden Viren 50-100 PFU
-Inkubationszeit 1-3 Stunden, Raumtemperatur bis 37 °C
- es ist wichtig, Wiederholungen zu machen, um die Genauigkeit der Ergebnisse zu überprüfen (6 bis 8 pro Verdünnung)
-Serumverdünnung, die eine 50 %ige Protektion ergibt (3 von 5 oder 4 von 8 paralellen Ansätzen) wird Endpunkt genannt.
-Reziprokwert = Neutralisations Titer NT 50
- bei Plaque-Reduktionstests, bei 80 % der Serum-Verdünnung oder mehr, wird Plaque reduziert
- nur wenig Anti-virale Ab's sind neutralisierend
- Neutralisierende Antikörper können gegen verschiedenste Proteine , die die Absorption, enzymatische Funktionen, Penetration oder Umhüllung beeiflussen, gerichtet sein.
Beispiel eines Neutralisationstests
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